该片叙述聂小倩（陈庭妮饰）穿越500年，来到现代碰上转世的宁采臣（莫子仪饰），以及心里一直挂念她的道士燕赤霞（李铭顺饰），展开人鬼三角恋，剪不断、理还乱时，更遇上树妖姥姥（刘松仁饰演）的绝地复仇。

一连串的离奇命案将法证部高级化验师布国栋、法医部高级法医钟学心、重案组高级督察凌倩儿和李展风等人联系起来。布国栋与钟学心因性情相近合作多年，一种难以言喻的默契渐渐滋长，故当布国栋与妻子周奕霏的婚姻破裂之后，才明白最了解自己的是钟学心；而凌倩儿与李展风于重案组合作无间出生入死，造就了一段真挚的爱情。此外，科学鉴证主任蒋卓君与何正民，在法证部一份严肃的法证部门工作中，成就了浪漫的金童玉女。这群专业的人员，从鉴证、化验、逻辑、心理、医学及科学等不同范畴，跨部门联合破案缉凶，竭力维护法纪。

梦想将来成为独立开店的西点师女主角美咲，朝着梦想前进、磨练技术，却渐渐地与恋爱无缘、忘了接吻的方法。某天，美咲被公司裁员，转职活动也不顺利，情况荡到了谷底时，与高中时的初恋情人柴崎千秋再会。美咲受到千秋的邀约，决定暂时在千秋经营、提供住宿的餐厅里打工。天真的以为能与千秋在同个屋檐下的美咲，没想到还有住着夏向、冬真另外两位兄弟。究竟理想中的王子千秋、花花公子冬真以及完全不把美咲放在眼裡的夏向，哪个才是能打开美咲沉重心房的真命天子呢？